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快速鼠尾鑒別試劑盒(PCR系列)
更新時(shí)間:2025-01-08
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廠商性質(zhì):代理商
生產(chǎn)地址:
快速鼠尾鑒別試劑盒(PCR系列)
產(chǎn)品介紹
1. 產(chǎn)品描述:
信勵(lì)致和®快速鼠尾鑒別試劑盒配備了整套的DNA粗提取及PCR擴(kuò)增體系,可直接快速地對(duì)小鼠組織(如鼠尾、鼠耳、鼠趾、肌肉等)樣本進(jìn)行PCR擴(kuò)增,無(wú)需勻漿、破碎、過(guò)夜消化、酚氯仿抽提、DNA沉淀或柱式純化等操作,操作更加簡(jiǎn)單快速。本試劑盒適用于10 kb以內(nèi)目的片段擴(kuò)增及4對(duì)引物以內(nèi)的多重PCR反應(yīng),可用于快速基因型鑒定、小鼠基因分型等。
2. 產(chǎn)品特點(diǎn):
(1)使用方便,試劑盒中提供的PCR擴(kuò)增體系含有染料,擴(kuò)增后可直接用于電泳檢測(cè)。
(2)兼容性好,試劑盒兼容4對(duì)引物以內(nèi)的多重PCR反應(yīng),大大加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
快速鼠尾鑒別試劑盒(PCR系列)
使用說(shuō)明
1. 產(chǎn)品組分:
組分/含量 | AB0360 | AB0415 |
組織裂解液 | 20 mL | 5×20 mL |
蛋白酶K | 400 μL | 5×400 μL |
2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液(含染料) | 1 mL | 5×1 mL |
2. 儲(chǔ)運(yùn)條件:
2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液(含染料)于-25~-15℃保存,其余組分2~8℃保存。干冰運(yùn)輸。
3. 注意事項(xiàng):
(1)使用組織裂解液時(shí),需將組織全部浸沒(méi)至裂解液中以保證最佳的消化效果。
(2)PCR預(yù)混液避免反復(fù)凍融。
相關(guān)數(shù)據(jù)
1. 裂解后直擴(kuò)測(cè)試:
使用本品對(duì)樣本進(jìn)行裂解和PCR擴(kuò)增檢測(cè),實(shí)驗(yàn)設(shè)置三組平行,結(jié)果如上圖所示,擴(kuò)增條帶清晰、明亮、單一,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對(duì)下游實(shí)驗(yàn)無(wú)不良影響,且2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液特異性好。
2. 多重PCR直擴(kuò)測(cè)試:
使用本品對(duì)樣本進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增檢測(cè),實(shí)驗(yàn)設(shè)置三組平行,結(jié)果如上圖所示,擴(kuò)增條帶清晰、明亮、無(wú)雜帶,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)有力地證明了本品中的組織裂解液對(duì)下游實(shí)驗(yàn)無(wú)不良影響,且2×鼠尾直擴(kuò)PCR預(yù)混液擴(kuò)增效率高,特異性好,兼容性廣。
常見(jiàn)問(wèn)題
1. 擴(kuò)增產(chǎn)量低或者無(wú)法擴(kuò)增?
原因分析:出現(xiàn)產(chǎn)物量低或者擴(kuò)增無(wú)條帶一般有以下原因:PCR 反應(yīng)中加入的裂解液過(guò)量;裂解液中混入了PCR抑制物;模板加入量不適合;PCR 循環(huán)數(shù)不夠;循環(huán)反應(yīng)退火溫度設(shè)置太高;PCR 引物錯(cuò)配嚴(yán)重。
解決方案:減少裂解液用量;或?qū)⒘呀猱a(chǎn)物稀釋10倍后再進(jìn)行PCR擴(kuò)增;或增大PCR反應(yīng)體系;裂解產(chǎn)物用量不應(yīng)超過(guò)PCR反應(yīng)總體積的1/10;增加PCR循環(huán)數(shù)以獲得更好的擴(kuò)增效果;降低退火溫度(每次降低3℃);重新設(shè)計(jì)引物并在BLAST檢測(cè)引物的特異性。
2. 非特異性擴(kuò)增?
原因分析:PCR退火溫度太低;循環(huán)數(shù)太多;或引物濃度/模板濃度太高;未在冰上配制PCR反應(yīng)體系;或配制完成后放置時(shí)間太久;PCR引物錯(cuò)配。
解決方案:升高PCR退火溫度;減少PCR循環(huán)數(shù);降低引物濃度或模板濃度;重新設(shè)計(jì)PCR引物。