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    常用的卵巢癌細胞的培養(yǎng)及細胞表達

    發(fā)布時間： 2021-10-09　　點擊次數(shù)： 4374次

    整理一篇關于卵巢癌細胞的培養(yǎng)方法和細胞的特征特點，由于卵巢癌早期缺少癥狀，即使有癥狀也不特異，篩查的作用又有限，因此早期診斷比較困難，就診時60%～70%已為晚期，而晚期病例又療效不佳，卵巢癌方向的研究也成為了目前基礎醫(yī)學實驗研究重點，下面我們分享部分我們實驗室有的卵巢細胞株的培養(yǎng)方法和特征。       

    部分細胞形態(tài)

    image.png

    CELL Name：NIH OVCAR

    image.png

    Cell Name：SK-OV-3



    細胞系
    		形態(tài)特征培養(yǎng)基
    		其他
    ID8小鼠卵巢表面上皮細胞單層，貼壁生長

    90%DMEM高糖(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A 雙抗(SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基（貨號：MD0101）；

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    		在C57BL/6小鼠體內(nèi)，可導致腹腔腫瘤和腹水的形成；常被用作卵巢癌的同基因小鼠模型

    caov-3

    人；卵巢腺癌細胞

    		來源于卵巢組織；上皮細胞樣

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0200)+SP（SD0008）+G/A (SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基（貨號：MD0125）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）


    Caov-4

    人；腺癌

    		來源于轉(zhuǎn)移部位：輸卵管的漿膜下層；上皮細胞；貼壁Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入20%胎牛血清FBS

    CHO

    倉鼠；卵巢細胞


    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：F12K*培養(yǎng)基（貨號：MD0401）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）


    CHO-K1

    倉鼠；卵巢細胞亞株

    		來源于卵巢組織；上皮細胞

    90%F12K(MD0400)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：F12K*培養(yǎng)基（貨號：MD0401）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液：無血清細胞凍存液 （SD0002）


    CHO/dhFr-

    倉鼠；卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷

    		來源于正常卵巢組織；上皮細胞IMDM培養(yǎng)基加入10%優(yōu)質(zhì)胎牛血清FBS；添加0.1mM次黃嘌（漂）呤，0.016mM胸腺嘧啶，100nM氨甲喋呤。該細胞為二氫葉酸還原酶缺陷細胞。  在沒有HT（次黃嘌（漂）呤-胸腺嘧啶）時細胞會死亡。細胞培液中加氨甲喋呤可以防止對藥物低抗性的回變細胞的生長。
    CTLA4 Ig-24倉鼠；卵巢細胞來源于卵巢組織；上皮細胞

    90%DMEM(MD0100)+10%胎牛血清(SD0100)+G/A (SD0038)

    DMEM*培養(yǎng)基（貨號：MD0101）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）


    ES-2

    人；卵巢透明細胞癌

    		來源于低分化卵巢透明細胞癌組織；成纖維細胞；貼壁；致癌

    90%McCOY's 5A（MD0900）+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：McCOY's5A*培養(yǎng)基（貨號：MD0901）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		在裸鼠中成瘤。該細胞對多種化療藥物包括doxorubicin, cisplatin, carmustine, etoposide 和cyanomorpholinodoxorubicin (MRA-CN)表現(xiàn)出低到中等的耐受性。ES-2細胞表達低水平的P糖蛋白。

    HEY

    人；III期卵巢乳頭狀囊腺癌

    		來源于子房組織；上皮細胞；貼壁；致癌

    90%1640基礎(MD0200) +10%FBS(SD0100)+1%GA(SD0038)  

    *培養(yǎng)基鏈接：1640*培養(yǎng)基（MD0201)


    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		HEY細胞系對烷基化劑順二胺二氯鉑（II）（順鉑）表現(xiàn)出一定程度的抗性

    HO-8910

    人；卵巢癌細胞

    		來源于卵巢癌病人腹水中；上皮細胞樣RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，加入10%胎牛血清。轉(zhuǎn)移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。
    HO-8910PM人；高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞
    		RPMI-1640(添加NaHCO3 1.5g/L, glucose 2.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)，加入10%胎牛血清。

    Lec1

    倉鼠；卵巢細胞

    		來源于卵巢組織；上皮細胞

    90%αMEM(MD0804)+10%胎牛血清(SD0100)+肌醇 43.2mg/L（SD0014）+葉酸 8.82mg/L（SD0016）+β-巰基乙醇 7.8mg/L（SD0031）+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：αMEM*培養(yǎng)基（貨號：MD0807）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS(SD0200)

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		Lec1 (原先叫做Pro-5wgaR1 3C)是從脯氨酸缺陷型的CHO克隆 Pro-5中挑選出來的能抗麥芽凝集素的突變株。Lec1 缺乏稱作GlcNAc-T1的糖基轉(zhuǎn)移酶，從而N-連接碳水化合物被阻斷在Man5GlcNAc2Asn中間體。對于研究N-連接糖基化改變對內(nèi)源糖蛋白或病毒感染、以克隆DNA轉(zhuǎn)染產(chǎn)生的糖蛋白的功能和區(qū)隔化的影響，這些細胞十分有用。

    NIH:OVCAR-3

    人；卵巢癌細胞

    		來源于卵巢腺癌病人惡性腹水；上皮細胞；貼壁；致癌

    80%1640(MD0200)+20%胎牛血清(SD0200)+0.01 mg/ml牛胰島素（SD0020）+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：1640*培養(yǎng)基（貨號：MD0220）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		與107細胞聯(lián)合皮下接種５只裸鼠21天后全部成瘤。NIH-OVCAR-3是研究卵巢癌藥物抗性的一個合適的模型系統(tǒng)且由于存在激素受體，這對于激素治療的評估或許是有用的。

    OV-90

    人；3級，IIIC期，惡性乳頭狀漿液性腺癌

    		來源于卵巢癌轉(zhuǎn)移部位：腹水；上皮；貼壁；致癌

    42%MCDB 105+42%M 199(MD0950)+15%FBS（SD0200）+1%GA(SD0038)

    *培養(yǎng)基：MCDB105/M199*培養(yǎng)基（MD1203）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    凍存條件：基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    致病基因：her2/neu +, p53 (mutated,Ser--> Arg mutation at exon 6, codon   215) Ref

    表達角蛋白基因

    SK-OV-3

    人；卵巢癌細胞

    		來源于卵巢腺癌，腹水轉(zhuǎn)移；上皮細胞

    90%McCOY's 5A（MD0900）+10%胎牛血清(SD0200)+G/A (SD0038)

    *培養(yǎng)基：McCOY's5A*培養(yǎng)基（貨號：MD0901）

    氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		此細胞對腫瘤壞死因子和幾種細胞毒性藥物包括白喉毒素、順鉑和阿霉素均耐受，

    SW 626

    人；III期腺癌

    		來源于子房組織；上皮細胞；貼壁；致癌Leibovitz的 L-15 培養(yǎng)基加入10%胎牛血清FBS

    TOV-21G

    人；3級，III期，原發(fā)性惡性腺癌; 透明細胞癌

    		來源于：子房；上皮細胞；貼壁；致癌含有1.5g / L碳酸氫鈉的MCDB105培養(yǎng)基和含有2.2g / L碳酸氫鈉的199培養(yǎng)基以1：1混合。再加入15%胎牛血清FBS

    致病基因：p53 +（野生型）

    表達角蛋白基因

    UACC-1598

    人；4級囊腺癌

    		來源于子房組織；上皮細胞樣；貼壁Leibovitz的L-15培養(yǎng)基加入轉(zhuǎn)鐵蛋白0.01 mg / ml；0.01 mg / ml胰島素；5μg/ mL（55 U / ml）過氧化氫酶；3.6μg/ mL（0.01 mM）氫化可（啲）的松；70μg/ mL（0.5mM）鄰磷酸乙醇胺；10 ng / ml人重組表皮生長因子（EGF）；3 ng / ml（0.01μM）雌二醇；0.8 ng / ml（1 pM）Na-L-甲狀腺素；額外的2 mM谷氨酰胺和5%胎牛血清FBS

    受體表達：低表達表皮細胞生長因子受體

    致病基因：表達N-myc， 真核翻譯起始因子5A2（eIF-5A2）；低表達c-erbB2; 不表達ras

    表達基因：不表達細胞角蛋白（MAK-6），黃體酮，ras；低表達c-erbB2；表達N-myc， 真核翻譯起始因子5A2（eIF-5A2）。

    UWB1.289

    人；卵巢癌

    		上皮細胞樣；貼壁

    50%的RPMI-1640培養(yǎng)基和50%的MEGM（來自Clonetics / Lonza的乳腺上皮生長培養(yǎng)基（MEGM Bullet   Kit; CC-3150）由MEBM基礎培養(yǎng)基和SingleQuot添加劑制成（ATCC不使用慶大霉素 - 兩性霉素B）。加入3%胎牛血清FBS

    注意：不要過濾*培養(yǎng)基。

    表達致病基因：p53

    表達抗體：表達細胞角蛋白7（CK-7），鈣網(wǎng)膜蛋白，Wilms的腫瘤蛋白（WT）；不表達BRCA1

    表達受體：不表達雌激素和黃體酮

    UACC-2727上皮樣，貼壁

    90%L-15(MD1100)+5%FBS(SD0200)+0.01 mg/ml transferrin+0.01 mg/ml insulin+5 µg/mL (55 U/ml) catalase+3.6 µg/mL (0.01 mM) hydrocortisone+70 µg/mL (0.5mM) o-phosphoethanolamine+10 ng/ml human recombinant epidermal growth factor (EGF)+3 ng/ml (0.01 µM) estradiol +0.8 ng/ml (1 pM) Na-L-thyroxine+2 mM glutamine+G/A (SD0038)

    定制*培養(yǎng)基：L-15*培養(yǎng)基（貨號：MD0000）

    氣相：空氣，100%；二氧化碳，0%。溫度：37攝氏度

    凍存條件/Cryopreservation:基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

    *凍存液：無血清細胞凍存液（SD0002）

    		her2/neu（+）；EGFR（+）；N-myc（+）MAK-6(+)




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